儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

SMC-1細胞，人胸膜瘤細胞 鼠傷寒沙門氏菌Ta98 大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E水溶性四氮唑-5質(zhì)量規(guī)格：BRGLT005

CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白水溶性四氮唑-4質(zhì)量規(guī)格：BRGLT004

MFC(小鼠胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 C2 / Compleme Compone 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 積雪草酸質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BRAsiatic acid

直結(jié)腸平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)積雪草酸（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Asiatic acid

NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicasin / NCSTN 人細胞裂解液 (陽性對照) 水合氧化前胡素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品OXYPEUCEDANINHYDRATE
人胎盤絨膜癌細胞;BeWo氫氯噻嗪雜質(zhì)CHydrochlorothiazide Impurity C質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HCC-9724細胞，人肝癌細胞 小鼠肥大細胞癌細胞,P815細胞 牛腎細胞;MDBK-d6Prednisolone-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進口

MDCK(犬腎細胞) 5×106cells/瓶×29--d3-腺嘌呤9-Methyl-d3 Adenine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

Promocell C-23010 Fibroblast Growth Medium , 成纖維細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500mlβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸, 縮減環(huán)已基銨鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口

牦牛皮膚細胞;BMU-S1β-煙酰胺腺嘌呤二核苷1酸,縮減二鉀鹽β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced dipotassium salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口
LEPR Others Human 人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 人細胞裂解液 (陽性對照) ETHANOL,70%70%乙醇生物技術(shù)級無色無混濁液體RT不sigma

人脈絡(luò)叢上皮細胞裂解物HCPEpiCL3-基-2-本噻坐啉腙言醋鹽 3-MqTHYL-2-BqNZOTHIcZOLINONq HYDRcZONq xy7noCHLORIDq 1490-12-1

RK1 Others Canine 狗 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) SAPONIN皂苷試劑級米白色至棕黃色粉末RTsigma

人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M IE8CobaltChlorideHexahydrate錄化鈷六水ACS級粉紅色結(jié)晶RTsigma

FL62891細胞，人肝癌細胞 小鼠白血病克隆細胞系,L6565細胞 小耳豬肺細胞;SEP-L1629-11-81,6-己二醇;1,6-二羥基;六亞二醇;六亞甘醇1,6-Hexanediol;Hexametxylene glycol;Hexane-1,6-diol
Rel Phospho-Ser503 Antibody人胚胎，皮膚，肌肉;M-20四螨嗪(標準品)Clofentezine質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,98.6%

PA317細胞，鼠胚胎成纖維細胞 人小細胞肺癌細胞,DMS153細胞 CL-0396NCI-H226(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2四螨嗪標準溶液(100μg/ml,u=4%)Clofentezine solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%

中國倉鼠卵巢細胞系;pDSr a2-mpl-X四螨嗪標準溶液(10μg/ml,u=6%)Clofentezine solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%

ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) 萎銹靈(標準品)Carboxine質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99.9%

穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E環(huán)(Standard for GC,>99.0%(GC))Cyclohexanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.0%(GC)

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