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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2羧基甲氧基胺半鹽酸鹽(>98.0%(T))質量規格：>98.0%(T)Carboxymethoxylamine Hemi

HUF Pellet 人成纖維細胞團塊 > 1 mio.cells 人內皮細胞裂解物HLECL吉拉德試劑 P(>95.0%(T))質量規格：>95.0%(T)Girard's Reagent P

CL-0194RF/6A(猴視網膜血管內皮細胞)5×106cells/瓶×24-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量：23.50-24.30 %)質量規格：含氮量：23.50-24.30 %4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione

TCN2 Others Human 人 TCN2 / anscobalamin-II CHO細胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))質量規格：>98.0%(HPLC)(T)N-tert-Butyl-α-phenylnitrone

人脈絡叢上皮細胞cDNAHCPEpiC cDNA4-傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)質量規格：>98%,BR4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide
小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養基 100mLxy7noXYetxylCELLULOSE纖維素高級米白色至黃色粉末RTsigma

Hepa 1-6小鼠肝癌細胞 Hepa mouse hepatoma cell line 1-6 DMEM+10%FBS溴酚綠;溴酚藍;四溴間酚磺酞 BroMocrqsol o7ium sclt;3,3′,5,5′-TqtrcbroMo-M-crqsol sulfoncphthclqin 76-60-8

IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白酸性品紅 Acid Fuchsin (Dye content, Approx.70%) 3244-88-0 25G 染色劑

Romas(人瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(人二倍體胚肺細胞)間環，英文名或英文縮寫：3-metxylcyclohexanol，級別：GR，99.8%，規格：100克

CL-0124IMR-32(人神經母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2MSMedium 10L/50L Sigma M5524
JAR(人胎盤絨毛膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MG-63, 人骨肉瘤細胞 人胃腺癌細胞;BGC-823蘇丹容量：50毫克

人腎近曲小管上皮細胞總RNAHRPTEpiC NAD-乳酸脫氫酶 D-Lactic Dehydrogenase 9028-36-8 1KU 通用試劑

BST1 Others Rat 大鼠 CD157 / BST1 人細胞裂解液 (陽性對照) 異惡草安 ISOXcBqN 8228-20-7

人滑膜細胞*培養基 100mL5ˊ-嶙酸脫氧胞苷，英文名或英文縮寫：Dcmp，級別：BR，99%，規格：500U

CHO-pt細胞，轉血小板基因倉鼠卵巢細胞 L6(大鼠成肌細胞) 615小鼠癌瘤株;Ca761(L-賴酸鹽酸鹽)
一氧化氮NO測試盒一步法魚源細胞地奈德標記13C3Desonide - Labeled 13C3質量規格：美國進口

DPP4 Others Human 人 DPPIV / DPP4 / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照) L-順式-鹽酸地爾硫卓L-cis-Diltiazem • HCl質量規格：美國進口

人卵巢表層上皮細胞HOSEpiC地爾硫卓Diltiazem質量規格：美國進口

PVRL1 Others Rat 大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 去乙酰地爾硫卓-d3Desacetyl Diltiazem-d3質量規格：美國進口

大鼠腸平滑肌細胞*培養基 100mLO-去地爾硫卓O-Desmethyl Diltiazem質量規格：美國進口
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。